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獼猴桃籽油抗衰老作用的實驗研究
時間:2011-10-8 17:34:26   瀏覽次數:次  

 

摘 要目的:探討獼猴桃籽油延緩衰老的作用機理。方法:30只SD大鼠隨機分為3組。對照組:每鼠每日灌服生理鹽水和背部皮下注射150mg/kg.bw生理鹽水;模型組:每鼠每日灌服生理鹽水和背部皮下注射150mg/kg.bw25%D-半乳糖溶液;獼猴桃籽油干預組:每鼠每日灌服獼猴桃籽油0.670g/kg.bw和背部皮下注射150mg/kg.bw25%D-半乳糖溶液;每組時間均為8周。8周后測定各組血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA) 含量及皮膚組織羥脯氨酸的含量。結果:與模型組相比,干預組血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性增高,丙二醛(MDA)含量則顯著下降,皮膚羥脯氨酸含量提高,差異均具有顯著性(P<0.05)。結論:獼猴桃籽油可通過SOD、MDA及羥脯氨酸的調節而起到延緩衰老的作用。
關鍵詞獼猴桃籽油;D-半乳糖;超氧化物歧化酶;丙二醛;羥脯氨酸;抗衰老
  獼猴桃具有很高的營養、醫療、保健、觀賞等開發利用價值,被譽為“水果之王”、“世界珍果”,是目前世界各國競相開發的果品之一[1]。相關科研、醫療和衛生部門研究結果表明,采用超臨界CO2萃取技術從獼猴桃籽中提取的獼猴桃籽油具有輔助降低血脂、軟化血管和延緩衰老等功效,在醫學、保健食品和美容護膚品領域具有非常廣泛的用途[2]。本研究通過觀察獼猴桃籽油對D-半乳糖擬衰老大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和皮膚羥脯氨酸含量的影響,探討獼猴桃籽油延緩衰老的機理。
1 材料與方法
1.1 材料與儀器
  獼猴桃籽油,由湖南老爹農業科技開發股份有限公司提供;實驗動物,SD健康大鼠30只,清潔級,雄性,雙耳無缺損,3-4月齡,體重180-220g,由華中科技大學同濟醫學院實驗動物中心提供;SOD、MDA、羥脯氨酸測定試劑盒,購于南京建成生物工程研究所;D-半乳糖, 由美國DEBET公司提供;其余試劑均為市售分析純。
  主要儀器有721 分光光度計、37℃恒溫水浴鍋、臺式高速離心機等。
1.2 實驗方法
1.2.1 實驗分組與給藥 SD 大鼠適應性喂養一周后,隨機分為對照組、模型組、獼猴桃籽油干預組,每組10只。上述各組均在相同條件下喂養,室溫控制為15-18℃,濕度70%左右,自由攝取標準飼料(華中科技大學醫學院動物中心提供),飲用干凈自來水。對照組每鼠按150mg/kg.bw每日背部皮下注射生理鹽水1 次(無菌操作),連續8周。模型組、獼猴桃籽油干預組,每鼠按150mg/kg.bw每日背部皮下注射25%D-半乳糖溶液1 次(無菌操作),連續8周[4],建立衰老模型。獼猴桃籽油干預組每鼠每日按0.670g/kg.bw灌服獼猴桃籽油。模型組和對照組均灌服等體積生理鹽水。
1.2.2 標本采集 試驗8周結束時,大鼠吸入乙醚麻醉后,用眼科鑷迅速摘除單側眼球,肝素抗凝管收集血液3ml,靜置30min后,以3000r/min離心10min,吸取血清放入EP管中-20℃保存,測SOD活性及MDA含量。取背部正中皮膚,用脫毛劑脫去鼠毛作10%皮膚組織勻漿,測皮膚羥脯氨酸含量。
1.2.3 標本檢測 血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、皮膚組織勻漿羥脯氨酸含量測定參照南京建成生物工程公司試劑盒說明方法測定。
1.2.4 統計學處理 所有數據均以均數±標準差(±s)表示,采用SPSS12.0統計分析軟件以t檢驗進行統計分析,以P<0.05作為差異性顯著的標準。
2 結果與分析
2.1 各組大鼠血清中SOD、MDA含量
  各組大鼠血清SOD、MDA含量的檢測結果見表1 。
表1 各組大鼠血清SOD、MDA 的含量( ±s)
組別
動物數(只)
SOD(NU/ml)
MDA(nmol/mol)
對照組
10
144.29±4.33
17.19±0.76
模型組
10
107.35±3.25
30.16±0.92
干預組
10
131.37±3.03
23.21±1.26
由表1可見,衰老大鼠血清SOD活性下降,與對照組大鼠相比有顯著性差異( P<0.05),干預組大鼠血清SOD 活性顯著高于衰老大鼠(P<0.05);衰老大鼠血清MDA含量較對照組大鼠明顯升高(P<0.05),干預組大鼠血清MDA活性顯著低于衰老大鼠(P<0.05)。
2.2 各組大鼠皮膚組織羥脯氨酸含量
各組大鼠皮膚組織羥脯氨酸含量結果見表2。
表2 各組大鼠皮膚羥脯氨酸的含量( ±s)

組別
動物數(只)
羥脯氨酸(μg/mg組織)
對照組
10
2.55±0.08
模型組
10
1.31±0.06
干預組
10
1.81±0.05

  由表2可見,衰老大鼠皮膚組織的羥脯氨酸含量減少,與對照組大鼠相比有顯著性差異(P<0.05),干預組大鼠皮膚組織羥脯氨酸含量明顯高于衰老大鼠 (P<0.05)。
3 討論
  衰老是生物體全身各組織、器官的退行性變化,是諸多病理、生理過程綜合作用的結果。衰老的代謝學說認為,新陳代謝是生命的本質,也是生命活動的基礎,衰老是機體代謝性障礙的結果。糖代謝在三大物質代謝中具有很重要的意義,其紊亂必然會引起心、肝、腎和腦等重要器官代謝異常,最終出現衰老。在一定時間內,連續給動物注射大劑量的D-乳糖,使機體細胞內半乳糖濃度增高,在醛糖還原酶的催化下,還原成半乳糖醇,這種物質不能被細胞進一步代謝而堆積在細胞內,影響正常滲透壓,導致細胞腫脹、功能障礙、代謝紊亂【3】, 使得動物多種組織、器官形態及生理、生化指標出現明顯變化,呈現與自然衰老相似的改變,這一過程與自然衰老相似【4】,該模型因造模本身周期短、模型穩定被廣泛應用于與衰老有關的各種實驗研究。
  研究還表明,隨著機體年齡的增加,其抗氧化能力呈增齡性變化,大量自由基為內因引起的脂質過氧化反應與細胞的衰老、死亡乃至整個機體的衰老進程都有著密切的關系【5】,表現為SOD的活性隨增齡降低,其活性與物種的壽命呈正相關,它在保護腦功能、延緩衰老方面發揮著重要作用【6】。而MDA是自由基損傷不飽和脂肪酸生成的脂類過氧化分解產物,MDA含量隨增齡升高也可以間接證明自由基水平升高及反映機體活性氧損傷效應【7】。本實驗結果證實,通過D-半乳糖誘導的衰老模型組大鼠血清SOD活性明顯低于對照組(P<0.05),而MDA含量則明顯高于對照組(P<0.05)。而服用獼猴桃籽油的干預組血清SOD活性明顯高于模型組,干預組的血清MDA的含量也明顯低于模型組。
  由于衰老, 機體膠原蛋白多肽鏈間的共價交聯程度增加, 使得皮膚變得僵硬少彈性,通透性低,膠原代謝率降低,使膠原組織中的游離肽或結合肽的羥脯氨酸含量降低【8】。實驗結果也證實,通過D-半乳糖誘導的衰老模型組大鼠皮膚羥脯氨酸含量明顯低于正常組(P<0.05),而服用獼猴桃籽油的干預組大鼠的羥脯氨酸含量明顯高于衰老組(P<0.05)。
  本試驗結果表明獼猴桃籽油可以通過提高血清SOD活性和降低MDA含量而提高整個機體的抗氧化能力,顯著改善或調整衰老細胞的新陳代謝,提高細胞的生命力,而且獼猴桃籽油還可以提高皮膚羥脯氨酸含量,增加皮膚彈性,起到同時延緩機體和皮膚衰老進程的多重抗衰老作用。
  綜上所述,獼猴桃籽油有很強的抗衰老作用,長期服用可達到延緩衰老的目的,其作用機理可能與獼猴桃籽油所含成分有關。獼猴桃籽油的主要成分是α-亞麻酸和亞油酸,含有一定量的維生素E及微量元素硒等物質[9]。有許多研究表明,α-亞麻酸能有效清除體內過多的自由基[10],維生素E本身也有抗氧化作用,進而達到有效延緩衰老的作用。
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